11.2.2 基因过表达技术的应用

11.2.2 基因过表达技术的应用

目前可通过基因过表达技术建立大肠杆菌表达系统、果蝇表达系统、酵母表达系统、昆虫表达系统、哺乳动物细胞表达系统和一些无细胞系的体外翻译系统等。在以上系统中,可通过让基因的表达水平高于生理状态,检测和观察基因过表达后相关性状和表型的变化,研究基因组中某一基因的相关功能。如可利用GAL4-UAS系统,使肺癌相关基因在杂交子代小鼠肺部特异性表达,建立小鼠肺癌模型,对肺癌相关基因表达水平进行检测,这为肿瘤相关基因和功能的检测提供了可借鉴的模式和方法。据报道,可采用一种新型腺病毒载体GV314与一种促代谢因子betatrophin重组,该载体具有CMV启动子、MCS、poly(A)的信号区等必需调控元件和同源重组序列,得到的重组腺病毒过表达载体导入宿主细胞后可实现betatrophin的过表达,继而宿主细胞出现致细胞病变效应,为betatrophin基因的功能研究奠定了基础。

基因过表达技术可在细胞水平和动物个体水平实现基因的过表达。细胞水平主要通过转染疾病相关的细胞系,可选择瞬时转染或稳定转染;动物水平主要通过构建转基因动物的方式实现,是整体水平的评价方式。研究基因组中某一基因的功能时,往往需要在细胞水平和动物水平均进行基因的过表达,通过表型的变化推断和证明基因的功能。