肝郁脾虚证动物模型的制备方法
肝郁脾虚证动物模型的造模方法研究较早，20世纪70年代，湖南医学院应用四氯化碳导致急、慢性损伤的肝郁脾虚模型是肝郁脾虚证模型的起始，这种化学药物造模对模型动物的损害较大，且与疾病的病因病机存在较大差异，不能反映肝郁脾虚的实质，应用已经逐渐减少。经过40余年的发展，肝郁脾虚证的造模方法有多种探索和改进。常见的单纯肝郁脾虚动物模型可通过夹尾刺激法、慢性束缚法或复合方法如束缚法结合食醋法、母子分离法结合束缚法、夹尾结合苦寒泻下法、复合应激法等制备而成。
（一）单因素造模法
1.夹尾刺激法
夹尾刺激法是根据“怒伤肝，久则郁”的中医原理复制而成，造模时使用尖端包裹了纱布的镊子钳夹大鼠尾巴末端1/3处，使其暴怒，并与其他大鼠厮打，进而激怒其他大鼠，所有暴怒大鼠尖叫挣扎但皮肤不破皮（如有抓伤破皮，则用0.5%碘伏消毒受伤部位，以防感染），每次持续30分钟，每日2次，持续21天，可制备肝郁脾虚证大鼠模型。该方法一般用于大鼠，也可用于小鼠，用于小鼠时，每日用塑料夹夹住小鼠尾巴30分钟，连续刺激15天即可诱导肝郁脾虚模型。
2.慢性束缚法
肝喜条达而恶抑郁，肝郁证造模的主要手段是将实验动物放置在不舒服的环境中，造成“郁怒”。慢性束缚法，是将大鼠置于狭小空间或固定肢体以限制其活动，使其郁怒不能宣泄而出现肝气郁滞，进一步损伤脾之功能，这与肝郁脾虚证的病因接近。造模时，只需要将大鼠束缚于束缚架上，分别固定大鼠胸、腹部，使其动弹不得，束缚过程不予进食、进水，每日3小时，连续21天，大鼠表现出明显的肝郁脾虚的证候，说明模型成功。
（二）多因素造模法
1.夹尾结合苦寒泻下法
造模过程分为两个阶段：第一阶段为使用尖端包裹了纱布的镊子钳夹大鼠尾巴末端1/3处，使其暴怒，并与其他大鼠厮打，进而激怒其他大鼠，所有暴怒大鼠尖叫挣扎但皮肤不破皮（如有抓伤破皮，则用0.5%碘伏消毒受伤部位，以防感染），每次持续30分钟，每日2次，持续13天；第二阶段，从第4天开始，实验大鼠每日以1.5mL/200g的剂量灌胃100%生药含量的大黄水煎剂，每日2次，同时将夹尾改为每日2次，每次15分钟，此阶段持续10天。也可每日刺激3次，从刺激的第三天开始灌胃同剂量的大黄，连续10天。均可制备肝郁脾虚证大鼠模型。
除大黄外，也可应用100%浓度番泻叶水煎剂，每日上午按1mL/100g的剂量灌胃番泻叶水煎剂，灌胃结束1小时后，夹尾致痛，用纱布包裹蝴蝶夹夹于大鼠尾部下1/3，每次30分钟，1次/天，持续14天。
2.慢性束缚加饮食失节法
此多因素造模法常同时进行，对实验动物进行慢性束缚，每日3小时，同时采用隔日喂食的方法，单日正常饮食，双日禁食禁水，持续21天可出现肝郁脾虚模型。也有学者再此基础上，根据“劳则气耗”的中医理论，再加上使大鼠过度劳累，即每日大鼠游泳至力竭，导致脾气虚，造模连续21天，制备肝郁脾虚证动物模型。
3.束缚法结合食醋法
《黄帝内经》载：“味过于酸，肝气以津，脾气乃绝。”因此，研究中常用束缚法结合喂食食醋法来制备肝郁脾虚动物模型。造模时，使小鼠每日在束缚模具中束缚2次，每次3小时，同时在其饮用水中加入食醋，制成5%的食醋水，饮用自由，连续造模35天，小鼠可出现肝郁脾虚证候。大鼠也可应用此法。
4.母子分离结合慢性束缚法
新生小鼠母子分离可使大鼠出现保持较高水平的皮质酮释放，并且出现明显的焦虑样行为，利用此可制备肝郁脾虚证动物模型。造模时，将孕鼠所产幼鼠进行母子分离连续14天，第15天开始母子同笼不进行任何处理，第24天使鼠断奶并母子分离，第28天雌雄分笼弃雌鼠至56天，此时，母子分离模型稳定；第61天开始，对大鼠进行慢性束缚，每日3小时，连续21天，可制备肝郁脾虚证动物模型。
5.复合应激法
复合应激法是采用多种因素，且相邻两天不重复使用1种因素对实验动物进行刺激，使动物预料不到刺激的发生，进而肝气郁结的方法。常选用的刺激包括禁食、禁水、电击、热烘、冷水游泳、昼夜颠倒、夹尾、束缚、倾斜鼠笼、水平震荡等。以上刺激随机安排，每日1种，相邻2天不使用同一种，连续28天，每种刺激在28天内不超过4次。造模结束后，动物表现出明显的肝郁脾虚证候。