从脾论治AS与肠道菌群相关研究

肠道菌群是肠道内微生物的总称，参与机体的营养、免疫、生物屏障与拮抗等过程，被称为“第二基因库”“虚拟的代谢器官”。现代研究已证实，肠道菌群参与AS的发生发展，且与中医脾的功能关系密切，为AS从脾论治提供了理论依据。

隋国媛等基于肠道菌群-胆汁酸-法尼醇X受体信号途径探讨了化瘀祛痰方抗AS的作用机制。实验将24只ApoE-/-小鼠给予高脂饲料8周，随机分为模型组、辛伐他汀组和化瘀祛痰方组，每组8只。另8只C57BL/6J小鼠作为空白对照组，给予基础饲料。于第9周开始，辛伐他汀组和化瘀祛痰方组分别给予对应药物治疗4周。观察主动脉病理组织形态学，检测心功能，血脂，胆汁酸（血清、肝脏、回肠、胆汁、粪便），回肠胆汁酸组分，肝脏胆固醇，盲肠内容物肠道菌群，回肠FXR、FGF-15和肝脏CYP7A1 mRNA、蛋白表达。研究结果发现，与空白对照组比较，模型组小鼠LVAWd、LVIDs显著增加，EF和FS显著降低，LDL-C、TG、TC水平显著升高，肝脏、胆汁和粪便的胆汁酸含量显著降低，回肠胆汁酸和肝脏胆固醇含量显著升高，回肠TCA和TCDCA水平显著升高，UDCA和β-MCA水平显著降低，Bacteroides水平显著降低，回肠FXR、FGF-15 mRNA和蛋白水平显著升高，肝脏CYP7A1 mRNA和蛋白水平显著降低。与模型组比较，化瘀祛痰方组小鼠EF和FS显著增加，LDL-C、TG、TC水平显著降低，胆汁和粪便的胆汁酸含量显著升高，回肠胆汁酸和肝脏胆固醇含量显著降低，回肠CA、DCA、TCA、TDCA水平显著降低；肠道Bacteroides、Clostridium水平显著升高；回肠FXR、FGF-15 mRNA和蛋白表达水平显著降低，肝脏CYP7A1 mRNA和蛋白表达水平显著升高。该实验研究认为，化瘀祛痰方通过影响肠道菌群结构，增加胆汁酸外排，抑制肠肝FXR/FGF15轴，促进肝脏胆汁酸的合成，维持胆固醇代谢平衡，最终实现其改善AS的作用。

隋国媛等同时围绕化瘀祛痰方对ApoE-/-AS模型小鼠肠道菌群驱动TMA/FMO3/TMAO通路的影响开展了实验研究。研究表明，氧化三甲胺（TMAO）与AS的发生发展密切相关，被认为是AS的独立危险因子。循环TMAO水平越高，心血管事件的发生率越高。TMAO可通过影响肝脏脂质代谢，促进泡沫细胞形成，介导血管内皮细胞炎症反应等促进AS发生发展。因此，如何有效抑制TMAO的生成是防治AS的关键所在。TMAO的生成有两个关键环节：①菌群将卵磷脂、胆碱、肉碱等营养素代谢生成三甲胺（TMA）。②TMA在肝脏经肝脏黄素单加氧酶3（FMO3）作用活化产生TMAO。因此，通过有效干预措施改变肠道菌群减低 TMA生成或降低肝 FMO3 活性或含量可抑制TMAO 的合成。采用广谱抗生素抑制肠道菌群后，可显著降低TMAO水平，抑制AS发生发展。实验在上面研究造模给药的基础上，观察肝脏病理组织形态，检测盲肠内容物肠道菌群，血浆TMA、TMAO含量，FMO3 mRNA和蛋白表达。结果与模型组比较，化瘀祛痰组细胞肿胀明显减轻，脂肪空泡显著减少，脂滴沉积减少。与空白对照组比较，模型组血浆TMA、TMAO含量，肝脏FMO3蛋白及mRNA水平升高；与模型组比较，辛伐他汀组和化瘀祛痰组血浆TMA、TMAO含量，肝脏FMO3蛋白及mRNA水平降低；辛伐他汀组和化瘀祛痰组各指标比较差异无统计学意义。肠道菌群Beta多样性分析，各组样本能够显著区分。基于属水平，与空白对照组比较，模型组拟普雷沃菌属、拟杆菌属、肠杆菌科志贺菌、副拟杆菌属相对丰度下降，gLachnospiraceaeUCG-006、罗氏菌属相对丰度升高；与模型组比较，化瘀祛痰组厌氧棍状菌属、gEubacteriumxylanophilumgroup、gLachnospiraceaeUCG-006、gRikenellaceaeRC9gutgroup、罗氏菌属相对丰度下降，拟杆菌属、柠檬酸杆菌属、肠杆菌科志贺菌属、副拟杆菌属、葡萄球菌属相对丰度升高。拟杆菌属、副拟杆菌属与TMA呈负相关，拟普雷沃菌属、拟杆菌属、副拟杆菌属与TMAO呈负相关。研究认为，化瘀祛痰方可能通过改变肠道菌群结构，减少TMA生成，降低肝FMO3表达，抑制TMAO合成，从而抑制AS发生发展。