细胞病理学和组织病理

近年来测定FSH 和葡萄糖苷酶的方法已经取代了具有侵袭性的睾丸活检法, 但是当一般检查结果不能确定诊断时, 睾丸活检可以将输精管阻塞和生精功能损伤区分开来。 当精子密度<2.5 ×107/mL 时, 应做睾丸活检, 以鉴别是属于阻塞性无精子症, 还是由于睾丸发育不良或睾丸萎缩而导致精子发生障碍的无精子症, 无精子症时只有睾丸活检才能确定是否存在单倍体生殖细胞及能否用于ICSI。 因此Schulze 等人主张活检后将睾丸组织冷冻保存。 输精管道重建手术前应做双侧睾丸活检以明确生精功能是否正常以及生精上皮的损伤是否是不育的原因。 睾丸活检还可以诊断和估计因内分泌功能紊乱所致睾丸精子发生不全的程度, 为选择内分泌药物、 手术治疗、 激素治疗的疗效估计提供依据, 还能确定是否是原发性还是继发性功能低下症。 一般无精子患者应选择体检后认为质量较好的一侧睾丸进行活检。

睾丸活检第2 个主要用处是发现睾丸原位癌(testicle carcinoma in situ),睾丸活检具有高度的敏感性和特异性。 超声检查发现任何睾丸组织回声不均一时都应做睾丸活检。 如果一侧睾丸因肿瘤切除需做另侧的睾丸活检, 这种情况下对侧睾丸肿瘤或原位癌的发病率明显升高(可达5%)。 患有隐睾症的成年患者在睾丸固定术后应做双侧睾丸活检以排除原位癌的可能。

睾丸活检可在局麻下取材, 可选用1%利多卡因10 mL 在腹股沟外环进行封闭麻醉, 阴囊切开区域的皮肤也应局麻。 切开阴囊皮肤暴露睾丸, 于白膜切开约5 mm 切口取出约一粒大米大小的组织即可。 取材组织应能做30 张包括睾丸管道的切片, 随后缝合各层组织, 要避免将皮肤和白膜缝合在一起, 否则会产生术后并发症。 还应注意不能将正常情况下分离的阴囊皮肤和睾丸的淋巴引流管道沟通, 以免发生不可控制的淋巴液混流。

固定和进一步的组织处理： 睾丸活检的最佳诊断方法是半薄组织切片学方法, 这种检查方法是在溶液Ⅰ(5.5%戊二醛, 0.05 M 磷酸盐缓冲液)和溶液Ⅱ(1%OsO4 磷酸盐缓冲液-saccarose 液)中切片, 包埋在环氧树脂或glycid中。 1μm 厚的半薄切片可用半薄切片机制成, 再用甲苯胺蓝/派若宁染色。 该法组织保存完整, 可以检查生殖细胞的细微结构, 还可判断精子细胞的发育阶段, 进而确定是否适用于TESE 和辅助生育方法。 也可以选择准确性和显著性稍差的石蜡切片组织学方法, 该法适用于免疫细胞化学法分析, 要求将新鲜组织固定于Bouin 液(15 mL 饱和含水苦味酸盐溶液, 5 mL 96%甲醛和1 mL 冰醋酸)中, 不用常用的福尔马林固定因为福尔马林保存睾丸组织效果差, 不能正确评价生精功能和诊断原位癌, 脱水固定后的组织移到石蜡中, 通常用切片机制成5 pm 厚的切片。 用周期性酸和Schiff′s 试剂染色使得管壁结构变化并可看到顶体, 通过顶体染色可以检查精子细胞的成熟阶段。

睾丸活检组织学检查： 睾丸活检的主要目的是排除肿瘤和原位癌, 诊断灶性或弥漫性唯支持细胞综合征以及判断是否生精功能障碍。 完全性唯支持细胞综合征(SCO)时生精小管直径缩小, Sertoli 细胞旁无新生精子, 灶性唯支持细胞综合征组织中尚可见比例不等的生殖细胞。 一般SCO 综合征患者都要检测FSH 浓度, FSH 浓度与生殖细胞发育不良的程度正相关。 生精功能阻滞是指精原细胞发育为成熟精子的过程被阻滞在精原细胞、 初级或次级精母或圆形精子细胞水平。 每次活检要分析100 张包括睾丸管道组织横切面的切片, 每张切片都要检查生精功能情况, 中位数代表评分数。 评分低时必须明确生殖上皮、 生殖细胞、 睾丸管道和管道间组织的情况, 有助于对生育能力障碍的本质和原因得出准确的结论。