大鼠应激性溃疡
在严重外伤、颅脑部疾病、大手术、严重感染、严重的急性或慢性内科疾病等各种应激情况下,引起胃或十二指肠黏膜急性损伤、糜烂、出血、溃疡形成称为应激性溃疡。
1.实验目的与原理
(1)实验目的:复制冷束缚大鼠应激性溃疡模型;了解应激过程中,H+回渗的作用和胃体黏膜溃疡的表现。
(2)实验原理:利用冷冻和束缚两个应激源的共同作用,诱导大鼠应激性溃疡的产生。
2.实验动物·雄性SD大鼠4只,体重180~200 g。
3.实验器械与试剂
(1)器械:手术器械,胃插管,4℃冰箱,大鼠固定板,火焰温度计,pH试纸,水槽。
(2)试剂:1%戊巴比妥钠,乙醚,生理盐水,试验液(55 mmol/L HCl,100 mmol/L NaCl),4%的中性福尔马林溶液。
4.实验方法
实验一:冷束缚应激法
(1)大鼠1只,四肢和头固定于大鼠固定板上,放入4℃冰箱持续3小时。对照组大鼠单独在鼠笼中自由饲养,避免激惹。
(2)取出冷束缚大鼠,1%戊巴比妥钠麻醉,开腹结扎幽门。方法:在胸骨下沿1 cm处,向下做一2 cm的腹部切口,找出大鼠胃底部的肠管,用丝线结扎;手术缝合关闭腹部切口;经口插管入胃,2 mL试验液洗胃,抽净洗胃液后,再注入该试验液2 mL,拔管;放置冰箱中。
取对照大鼠,同样麻醉后固定于鼠板上,开腹结扎幽门,手术缝合关闭腹部切口。经口插管入胃,2 mL试验液洗胃,抽净洗胃液后,再注入该试验液2 mL,拔管。
(3)1小时后颈椎脱臼处死对照组大鼠和冷束缚大鼠,取胃用2 mL注射器抽取胃内容物,送检测定Na+、H+浓度。
(4)取下大鼠胃体,剖开后用棉签清理污物和血迹,清查黏膜皱襞处出血点、水肿、溃疡的数量。与对照大鼠胃黏膜状况进行比较。
实验二:水浸束缚应激法
(1)SD大鼠1只,术前禁食24小时,禁水1小时,用乙醚轻度麻醉后,将其四肢绑扎固定于鼠板。待其清醒后浸于20℃左右的水槽中,水面浸至剑突水平(图14-7)。

图14-7 水浸束缚应激
(2)待浸泡20小时后,将动物从水中取出,1%戊巴比妥钠麻醉后断头处死。
(3)擦干皮肤,立即剖检。先将幽门用线结扎,然后用注射器抽4%的中性福尔马林溶液10 mL,自食管注入胃内,拔出针头结扎贲门。在两结扎线的两端切断食管及十二指肠,摘下全胃。
(4)待30分钟后,沿大弯剖开,此时胃黏膜由于福尔马林的浸渍已发生组织固定,不至于因剖开胃腔而皱缩,影响对病变的辨识。
5.注意事项
(1)冷束缚的温度及时间应严格掌握。
(2)手术开腹取胃,动作要轻不要损坏胃。
(3)胃管插入时小心操作,防止损伤胃黏膜甚至穿孔。
用本法诱发应激性溃疡成功率几乎达到100%,重复性好。用抗胆碱药及中枢抑制药可以减少其发生率。尽管这种溃疡与人的消化性溃疡不同,但由于实验方法简单,结果可靠,迄今仍是研究抗溃疡药物一种常用的实验模型。