二、极体活检

极体是卵母细胞成熟分裂的产物，既不参与胚胎的发育，又无任何已知的功能，极体活检具有比卵裂球活检更高的安全性。极体活检及其遗传学分析可在获卵后48 h内完成，更符合PGD的时效性。同时，在某些国家和地区，因宗教、伦理和道德等原因，极体活检可能较卵裂球活检更容易被接受。

（一）第一极体活检

几乎是在Handyside于1990年报道卵裂胚胎活检PGD妊娠成功的同时，Verlinsky进行了卵母细胞第一极体活检部分常染色体隐性遗传病诊断的。当时的方法是，获卵后3 h，透明质酸酶去除卵母细胞外包颗粒细胞，卵母细胞移至含0.1 M蔗糖的培养液中促使卵细胞质收缩，吸取第一极体后，卵母细胞再移至IVF培养液中，2 h后常规体外受精开始。第一极体遗传学分析确定为突变基因纯合，受精胚胎移植；第一极体为正常基因纯合，胚胎放弃移植。由于该分析方法在精卵细胞受精之前进行，故当时被称为胚胎前遗传学诊断。

（二）第二极体活检

减数分裂过程中同源染色体同源片段可发生交换，导致第一极体杂合子的产生。此时第一极体的基因分析便不能用于卵细胞遗传组成的确定，而且这种交换发生率在染色体末端区域可达50%，故第一极体活检，卵细胞遗传学分析的应用范围显得十分有限。此外，导致胚胎染色体多体或缺体的染色体不分离还可发生于卵细胞的第二次减数分裂。为此，第二极体活检便导入极体活检卵细胞遗传学分析之中。由于卵细胞的第二极体排出发生在卵细胞受精之后，所以目前的极体活检实际已不再是原来意义上的胚胎前遗传学诊断。但通过原核期受精卵的冻融技术，仍可保证遗传组成正常的卵细胞发育成胚胎移植，该点对某些有宗教、伦理争议的地区和国家很有意义。

（三）极体活检操作的注意事项(https://www.daowen.com)

目前极体活检常常采用透明带切割法和斜面的极体活检针直接穿刺活检。为尽量减少纺锤体损伤的可能，通常在偏离极体的部位施行透明带开孔和第一极体的吸取。IVF或ICSI受精后，再采用相同的方法吸取第二极体。女方年龄相关的染色体非整倍体诊断，可采用受精后第二极体的同步活检。极体经PCR或FISH分别检测基因位点和染色体组成。活检后卵细胞经培养发育成卵裂胚胎或囊胚后，选择分析结果正常者移植宫内，也可先进行冻存，待遗传组成确定后，在下一周期选择正常受精卵复苏培养至胚胎移植。

由于可能损伤细胞纺锤体，受精前卵母细胞的第一极体活检一般不采用酸化Tyrode 液或激光透明带开孔，但第二极体活检，可选择机械、Tyrode液或激光方法。

（四）极体活检的可靠性

迄今为止，尚未见活检后卵细胞受精率、卵裂率、囊胚形成率的明显下降或多精受精的显著性上升。胚胎移植后的着床率、着床后的胚胎宫内生长发育及婴儿出生后的随访，也均未发现与非活检者存在显著性差异。第二极体活检的小鼠实验结果也与上述结果相似。

由于采用了第一和第二极体的序贯活检分析，其单基因病诊断的准确性常常显得比卵裂球活检分析更高些。目前，极体活检主要应用于与妇女年龄相关的卵细胞染色体数目异常的分析。据报道，应用13、18和21探针进行FISH极体染色体检测后，选择正常受精胚胎移植，胚胎着床率可明显提高。极体仅含有母源性遗传物质，不能检测父源性基因或染色体组成，不能确定胚胎性别是主要缺点。