胚胎培养液的发展历史

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（一）动物胚胎培养液的发展历史

最初人们尝试使用血清等进行胚胎培养。1932年，离子成分确定的培养液Krebs Ringer Biocarbonate（KRB）成为目前用于胚胎培养的各种培养液的基础。1956年，Whitten用含有葡萄糖和小牛血清白蛋白的碳酸氢盐培养液将8细胞鼠胚体外培养至囊胚。两年后McLaren等从体外培养鼠胚中获得妊娠和子代。随后，Whitten等在培养液中添加了乳酸，支持2细胞期鼠胚的体外发育。Brinster等改良了Whitten液，降低了乳酸浓度，添加了丙酮酸，成功研发了鼠胚中最常用的M16液，其离子成分均与KRB类似。含有4-羟乙基哌嗪乙磺酸（HERES）的M16在培养箱外短时间内可维持相对稳定的pH，因此适用于体外受精的显微操作。虽然M16液提高胚胎体外培养的效率，但不能克服鼠胚的2细胞阻滞。

20世纪80年代末期和90年代初胚胎培养体系有了新突破，主要针对鼠胚2细胞阻滞改良了培养液成分，如CZB（由Chatot、Ziomek 和Bavister等人研发）和SOM（SOM），及 K＋ supplemented SOM（KSOM）。这几种培养液均含有M16培养液类似的离子成分，但增加了谷氨酸和EDTA，降低了渗透压，及卵裂期胚胎培养液中葡萄糖浓度。目前这几种培养液的成功应用不仅克服了鼠胚的2细胞阻滞，还可获得稳定的培养效果。

（二）人类胚胎培养液的发展历史

最早使用的人类胚胎培养液是添加血清的体细胞培养液如 EBSS（EBSS）和Ham'sF10等。EBSS液由 Tyrode 液改良。试管婴儿之父 Edward 早期用于人类胚胎培养的就是EBSS。Ham's F10则是含有多种成分的支持体细胞培养的溶液。80年代中期Quinn等研发（HTF）的培养液在人类IVF中被广泛使用，其无机离子浓度也与M16和Whitten液类似。在80年代，胚胎主要在体外培养2～3 d，然后移植入子宫。90年代始，胚胎培养的时间基本延长到3 d。

随着HTF在人类IVF领域的成功应用，多种商业化供应的培养液陆续出现。目前商业化供应的胚胎培养液主要有两种：序贯培养液和单一培养液。前者是基于“返回自然”的理念，即根据输卵管内环境的自然变化而设计；而后者则是让胚胎自然选择其需要的物质。90年代末期，Gardner团队开始首先应用序贯培养液。序贯培养液主要包括受精液、卵裂液和囊胚培养液。卵裂液的成分满足D1～D3的需求，而囊胚培养液则由更加复杂的成分满足囊胚的发育，如Vitrolife的G-1TM系列培养液是原来G-1的改良版，而G-1的离子浓度与SOM接近。单一培养液如LifeGlobal'sGlobal medium和GyneMed's GM501与KSOM类似。但目前两种培养系统的临床应用方面并未见明显的差别。