滋养外胚层细胞活检

极体和卵裂胚胎活检，能提供遗传分析的材料仅1～2个细胞，考虑到异常嵌合体的存在，细胞核丢失或缺如的可能及外源性DNA污染的风险，获取更多细胞进行重复试验对PGD诊断显得十分迫切。桑葚期胚胎细胞数已较多，但因细胞间的连接已经发生，分化已经开始，活检存在着特异性损伤的可能。

受精后5～6 d的胚胎，细胞分化成外包的滋养层细胞和内在的内细胞团，并在中央形成囊腔而成为囊胚。此时，细胞总数已增生至60～90个，其中滋养层细胞约占细胞总数的3/4以上，在以后的胚胎发育中主要形成绒毛组织，不直接参与胚胎胎儿结构的形成。故囊胚期胚胎滋养层细胞活检，是克服极体和卵裂球活检可供材料过少、遗传学分析困难的主要方法。(https://www.daowen.com)

囊胚滋养外胚层细胞活检通常采用二步法：首先在内细胞团对侧的透明带进行透明带开孔，方法基本同于卵裂胚胎透明带开孔。透明带开孔可在活检前段D3进行，也可在活检当天D5或D6进行。目前主要采用激光打孔打断孵出的滋养外胚层细胞与囊胚其他细胞的连接，使用结合吸取针吸取，获取细胞。

囊胚滋养层细胞活检可获取多个细胞，不仅可克服上述的卵裂胚胎活检PGD诊断的缺陷，还可进行胚胎染色体核型分析。活检的滋养外胚层细胞数大于10，着床后滋养层细胞分泌HCG量会有所下降，但这种下降可通过外源性HCG而得以补偿。囊胚活检成功的最大困难是，长期以来一直偏低的囊胚形成率和透明带切割后滋养层细胞孵出率。不过随着序贯囊胚培养液的商品化，囊胚形成和孵出率的提高，该问题对囊胚活检的影响正逐渐减少。激光透明带打孔透明带下滋养层细胞直接吸取技术的建立，进一步简化了囊胚活检的技术过程。