原核的形态评估
原核数目为1PN或≥3PN的受精卵被认为是异常的,一般不能被用来移植。当雌雄原核大小差异大于4μm,两个原核位置远离或伴有碎核及微核存在时,胚胎发育潜能低下。原核中核仁的大小、数目、排列方式与胚胎的发育活力相关。核仁大小、数目不均等及排列有差异时,胚胎发育出现异常。受精卵胞质中有时会出现圆形、扁平、半透明的盘状物,电镜证实为滑面内质网(SER)聚集,对临床结局有不利影响。但合子中胞质晕圈的出现与临床结局呈正相关。
(一)原核大小
两原核大小基本相似。雌雄原核大小差异>4μm,或伴有微核或碎核存在时,形成的胚胎会伴随有染色体异常和发育潜能丧失;来源于这些合子的胚胎不应被用来移植。应用FISH技术分析来源于大小原核的IVF的12枚胚胎和ICSI的26枚胚胎,结果发现染色体异常率分别达到50%和88.5%,因此建议移植来源于原核大小差异明显的胚胎前,要先确定这些胚胎的倍性。在正常的受精评估时间(授精后16~18 h)内可以观察到原核比正常原核小的现象,可能的原因是卵母细胞成熟度欠缺而延迟受精或配子缺陷引起,移植此类胚胎有种植的可能。
(二)原核位置
精子中心粒进入卵子后,获得蛋白形成中心体,进一步与成核微管形成精子星体。来自精子星体的微管拉动雌原核,两个原核逐步靠近。正常情况下两原核相邻并紧靠在一起;80%的两原核相离的胚胎出现延迟发育和发育停滞,这种情况在附睾或睾丸精子中的受精中发生最为频繁。原核位置决定卵裂面。正常情况下第一次卵裂面通过原核轴。大多数合子中的原核位于胞质中央,第一次卵裂有规则的发生,产生正常的发育胚胎。当原核位于胞质周边时,卵裂仍依照原核轴进行,时常会导致异常卵裂,胚胎发育停滞,胚胎种植能力低。(https://www.daowen.com)
(三)原核轴与极体平面位置
精子穿透卵子,卵子被激活后,排出第二极体,此时建立极轴。原核沿着极轴的正确排列对第一次卵裂和正常发育非常重要。两个原核旋转并且相互靠近,此时两个原核中的染色质开始极化,在旋转的过程中,原核的长轴平行于极体平面。在进一步的旋转过程中,原核会排列到极轴上去。当原核旋转后没有排列到极轴上,原核轴与两极体形成夹角时,会引起不均等卵裂和碎片的产生,形成的胚胎质量差。
(四)原核膜破裂/融合
精子穿透后,两原核相互迁移并且复制各自的DNA。在第一次卵裂发生前,原核的核膜消失,两套单倍体基因组融合,含有两个中心粒的中心体重新定位到纺锤体的两极,控制细胞分裂。早期核膜破裂(22~25 h)可以作为胚胎质量和活力评估的一个指标,移植来源于早期核膜破裂的胚胎可以获得更高的临床妊娠率和着床率。