其他生物学评估方法

四、其他生物学评估方法

1.活性氧

氧参与新陈代谢、线粒体呼吸和氧化磷酸化,在有氧代谢的电子传递过程中,摄取的氧约有5%转变成氧自由基,包括超氧阴离子、羟自由基和过氧化物等从高能电子中泄漏出来,统称为活性氧(ROS)。因其具有额外不匹配电子的存在而性质十分活跃,能与任何分子发生氧化反应,从而改变后者的结构及功能。ROS参与细胞的生理过程,在细胞损伤修复、细胞增生、凋亡等信号传递过程中发挥重要的调控作用。但是过量的ROS导致细胞功能异常,主要包括核DNA和线粒体DNA突变或缺失,细胞膜脂质过氧化导致膜流动性改变,蛋白的氧化损伤导致重要酶失活。

早期胚胎抗氧化保护机制尚未发育完全,对氧化损伤非常敏感。过量的ROS导致胚胎碎片增加、胚胎发育迟缓、停滞甚至胚胎死亡。

Mohamed A等对行IVF和ICSI第三天胚胎培养液中的ROS进行测定,发现妊娠组ROS含量显著低于非妊娠组(IVF:27.1 VS 67.0,ICSI:25.6 VS 65.5)。Zofnat Wiener-Megnazi在胚胎移植前使用化学发光法(TCL)测定培养液中氧化应激参数,发现TCL振幅和TCL比值对妊娠具有预测价值,TCL振幅小于210和TCL比值小于80%者对妊娠的阳性预测值可达70.6%。Das S等研究了卵泡液中ROS对胚胎质量的预测,认为ROS和脂质过氧化(LPO)不影响卵母细胞的成熟度,但是和胚胎质量相关。卵泡液中ROS和LPO水平低的卵母细胞形成的胚胎质量较好。

2.可溶性人类白细胞抗原G

可溶性人类白细胞抗原G(sHLA-G)为妊娠过程中重要的免疫耐受分子,选择性高表达于绒毛外滋养细胞,在胚胎植入子宫过程中通过调节细胞因子分泌调控滋养层细胞的侵入,在母体对滋养层细胞的容受机制中起了关键的作用。胚胎可以分泌sHLA-G,能够避免胚胎被母体排斥而促进其成功着床。胚胎在发育早期sHLA-G分泌较低,随着胚胎自身基因的激活,sHLA-G分泌增多。(https://www.daowen.com)

通过对胚胎培养液中sHLA-G的检测,发现只在部分胚胎的培养液中检测到sHLA-G的存在。sHLA-G是否可测与胚胎形态学评分和患者年龄无关,即质量好的胚胎和质量差的胚胎均有sHLA-G阳性及阴性者,各年龄段患者胚胎均有sHLA-G阳性及阴性者。因为sHLA-G在胚胎自身基因激活后分泌增加,因此在胚胎发育的第5~6 d检测更有意义。而且,对于胚胎质量较好的胚胎,sHLA-G的检测价值更高,因为只有质量好的胚胎才有能力分泌更多sHLA-G。

Yie SM等通过对胚胎培养液sHLA-G的检测,将胚胎分为sHLA-G阳性组与sHLA-G阴性组,提出sHLA-G是否可测可以作为评价胚胎质量的指标。结果显示,sHLA-G阳性的胚胎移植后临床妊娠率显著高于sHLA-G阴性的胚胎(48.4%VS17.1%)。sHLA-G的检测对于高龄患者更有意义,大于38岁患者sHLA-G阴性组妊娠率为0%,而sHLA-G阳性组妊娠率可达42.4%。

使用sHLA-G评估胚胎质量应建立在形态学评分的基础上,尤其适用于当胚胎质量较好、形态学评分相同、难以决定移植胚胎时,选择sHLA-G阳性胚胎可提高妊娠率。

因此,生物学评估方法在评估胚胎质量、预测妊娠结局方面具有一定的作用。将传统的形态学评估和生物学评估结合起来,有助于选择最具发育潜能的胚胎进行移植。然而目前生物学评估存在以下方面的问题:①检测方法不够成熟和稳定,需要较高的专业技术和昂贵的仪器;②评估指标的灵敏度和特异性需要进一步研究;③生物学评估的效果还需临床应用予以确定。目前尚无一种生物学评估指标明确作为选择优质胚胎的依据被常规应用于临床。

综上所述,将传统的形态学分析与动态分析和生物学评估结合起来,可能是今后评估胚胎质量、预测胚胎发育潜能的趋势。目前这方面的研究尚处于起步阶段,还没有一种胚胎生物学指标明确作为选择优质胚胎的依据被常规应用于临床,需要进一步研究证实和发现。如何提高预测早期胚胎发育潜能的能力,增加胚胎种植率和临床妊娠率,仍然是辅助生殖领域面临的巨大挑战,尚需深入研究。

(林晓潭)