卵冠丘复合物的收集
（一）取卵术
1986年，Feitctinger及 Kemeter报道了阴道B超引导下卵泡穿刺取卵术。目前为全世界各中心常规使用，其优点是安全微创，简便快捷，无论盆腔是否有粘连均可以操作，取卵率可达到90%以上，术后患者即可下床走动，并且可多次取卵增加患者的妊娠率。
患者在取卵前，工作人员应调整取卵针的抽吸负压100～102 mmHg范围内，如果负压过小抽吸力度不够，可能导致卵母细胞的丢失；反之负压过大，可能会导致卵母细胞变形，影响其后续的受精及胚胎发育潜能。此外，还应确保恒温试管架的温度已达到37℃，尽量与体内温度一致，以免卵母细胞在体外受到温度的影响。
（二）卵-冠-丘复合物识别
1.取卵前工作人员先确保IVF工作站恒温台温度已经达到37℃。
2.取卵前工作人员应详细查阅患者的病史、精液情况、卵泡数目和是否有传染性疾病，如HBV、HCV和梅毒等。对重复治疗的患者，应对前次治疗周期的获卵数、授精方式、受精率、胚胎质量等细节进行记录。
3.取卵手术开始30 min前需再次确认已经打开IVF工作站风机及37℃恒温台，检查显微镜工作状态是否良好，准备如下物品（根据卵泡多少不同准备不同数量）。
（1）10 cm培养皿。
（2）无菌废液瓶1个。
（3）无菌巴氏吸管及吸头。
（4）1 mL无菌注射器及针头。
（5）患者姓名标签（双方姓名）。
（6）肝素钠（终浓度为10 IU/mL）加入平衡好的卵泡冲洗液中混匀，供取卵术中冲洗取卵针和卵泡。(https://www.daowen.com)
4.手术开始前，在患者清醒状态下，由医师与患者核对患者信息，并由患者签字确认。实验室人员再与取卵医师核对患者夫妇姓名及患者签字，并在该患者的IVF实验室记录单上登记手术开始时间。
5.接收卵泡液时与取卵人员核对患者姓名，将取卵人员收集的卵泡液小心倒入10 cm培养皿中，卵泡液及冲洗液收集到无菌试管内，传递至IVF实验室，将混合液轻轻倒入一个10 cm培养皿中，在10倍解剖显微镜下观察。
6.成熟的卵泡液（FF）为亮黄色，后一段抽出的卵泡液有血染，表明卵泡中的颗粒细胞已经脱落，卵泡内膜细胞及其中的血管已经暴露。在显微镜灯光下，肉眼可辨认直径3～5 mm的黏液团，黏液团中有典型的卵和放射冠结构，即卵-冠-丘复合物（OCCC）。
7.卵母细胞100～150μm直径大小，透明带8～10μm厚，紧紧围绕在卵母细胞周围的颗粒细胞称之为放射冠。当OCCC不够成熟时卵丘细胞没有充分分散，OCCC较小。在抽吸过程中可能有部分卵丘脱落，使OCCC变小，有时黏液团中没有卵和放射冠结构，只含大片的卵丘颗粒细胞。
（三）注意事项
1.抽出的卵泡内容物暴露在外界环境中，环境因素如温度变化、pH改变或光线照射等对卵母细胞均有损害，影响卵的受精能力和受精后的发育潜力。一般在室内空气中暴露2 min，pH可上升到非生理状态。为了能迅速发现OCCC，将吸出的液体倒入平皿中，其厚度以不超过0.5 cm为宜。必要时可在倒置显微镜下进一步判断其卵和OCCC成熟度，并尽快转移到卵培养液或授精培养液中，标记双方姓名，置于培养箱中。
2.在该患者的IVF实验室记录单上登记取卵数目，评估OCCCs形态学特征、成熟度等，向手术医师报告该患者总获卵数，彻底清理用过的巴氏吸管和选卵培养皿等，准备下一位患者的取卵手术。
3.对于卵泡少（2个以下）或取卵困难（单侧卵巢3次穿刺仍未出卵）的患者，如未取到卵，应在选卵皿中保留卵泡液，经双人再次仔细检查核对确认后告知手术医师。
4.收集卵过程中，如遇到有卵巢囊肿、巧克力囊肿、输卵管积水等患者，或者在采集过程中，发现卵泡液为暗红色、灰色或者为水样等，应在热台上保留卵泡液，待其他卵母细胞清洗培养到四孔中后，最后在异样卵泡液中收集卵母细胞，清洗后将该卵母细胞单独放置一孔，并在记录单上标明。提醒实验室后续处理过程要注意观察及相应处理。
5.取卵时，上一患者的器皿未清理好时，绝对不得接收下一患者的卵泡液。
6.当取卵顺序发生变化时，手术医师应提前通知实验室相关人员。
7.全部取卵结束后，再次临床与实验室核对每位患者的获卵数，确认无误后，清理台面，将废弃物按医学垃圾处理原则分类处理。