ICSI的影响因素
(一)非技术类因素
1.卵母细胞质量
直接影响受精结局和胚胎质量。卵膜弹性是评估卵母细胞质量的参数之一,显微注射过程中卵膜弹性的好坏提示卵母细胞的质量。Dale等研究显示:ICSI注射过程中卵膜正常破裂的卵子的存活率、受精率、卵裂率及种植率高于卵膜易破型。虽然女方年龄不影响ICSI受精率,但是妊娠率随着年龄的增长而降低。尤其是女方年龄>40岁时胚胎种植率及活产率显著降低,其中卵母细胞质量下降是主要原因。
2.精子因素
精子形态正常率对ICSI结局有无明显影响,目前尚存争议。有研究者对比了射出精子和睾丸精子ICSI的妊娠结局,虽然两组精子形态正常率有统计学差异,但是受精率、卵裂率、种植率和妊娠率均无差别。也有学者认为精子头部异常是精子形态异常的主要类型,约占70%。精子头部形态异常尤其是空泡头、锥形头和无定形头畸形,会影响精子顶体的形态和大小,从而影响正常受精。
目前比较公认的是圆头精子症是精子形态中影响ICSI受精率的特殊情况。研究报道仅将圆头精子注入卵胞质后受精率并不高,主要原因是卵母细胞不能被激活。而在ICSI过程中通过辅助激活卵母细胞的方法,可提高圆头精子症的受精率和妊娠结局。
(二)技术类因素
1.卵母细胞激活理论上认为,较猛烈抽吸卵胞质,显微注射过程可影响细胞内Ca2+振荡,从而促进卵母细胞激活。但是,临床上目前尚存争议。(https://www.daowen.com)
2.卵母细胞结构破坏
显微注射损伤卵母细胞导致死亡的发生率为7%~14%。原因可能包括:①显微注射引起卵母细胞膜性结构、超微结构及纺锤体的破坏,导致单倍或三倍体胚胎的形成;②损伤是否发生与卵母细胞质量有关。有的卵母细胞卵膜易破,容易发生卵胞质外漏,死亡率达14%。此类卵母细胞常见于大剂量下丘脑促性腺激素治疗、血液中雌二醇水平较低的患者;③注射过程中培养环境的改变,如温度的改变也能导致纺锤体的不可逆改变;④与ICSI经验积累相关,随着经验积累的增加,损伤率也会降低。因此,要求操作者应具备熟练的显微穿刺技巧,以缩短操作过程及减少对卵母细胞的损伤。
3.注射部位
不同注射部位对卵母细胞和胚胎质量的影响也不同。研究发现大多数成熟卵母细胞的纺锤体在第一极体附近,显微注射时将第一极体置于6~7点或11~12点的位置对纺锤体损伤最小,此时3点部位进针时注射针的斜面背向极体方向,可以减少对纺锤体的损伤。
4.不同破膜类型
显微注射过程中不同破膜类型将影响受精卵的进一步发育。目前常用的破膜类型是A型:注射针穿刺卵膜过程中,直接进入卵胞质内,无须回吸卵胞质;B型:注射针穿刺到卵胞质深部时,轻微回吸少许胞质,卵膜即穿破;C型:注射针穿刺到卵胞质深部时,用力回吸一定量胞质,卵膜才穿破。研究显示B型破膜的胚胎质量最好,A型最差。原因可能是B型破膜的操作过程比较柔和,对细胞骨架结构损伤最小。
5.PVP的影响
目前大多数生殖中心ICSI时仍用PVP,其对受精及胚胎质量等是否造成影响,尚待进一步研究证实。有研究报道对于活动力良好的精子,降低PVP的浓度至3.5%,可以提高ICSI的优质胚胎率。但是,对于活动力差的精子,降低PVP浓度则对ICSI结局无明显影响。