玻璃化冷冻的基本过程

三、玻璃化冷冻的基本过程

为了降低高浓度冷冻保护剂对细胞的毒性作用,玻璃化冷冻通常使用两步平衡法。先将胚胎放入含较低浓度冷冻保护剂(通常使用高浓度溶液浓度的一半)的平衡溶液中平衡,使渗透性冷冻保护剂能够充分渗入细胞内,并使胚胎细胞逐步脱水,在此过程中,也能看到细胞体积从缩小到重新扩大的变化。然后将胚胎置入含较高浓度冷冻保护剂的玻璃化溶液中,经较短时间平衡后,将胚胎装入冷冻容器,投入液氮。(https://www.daowen.com)

复苏过程与程序冷冻复苏方法类似,采用较快的升温速度,升温速度过慢会发生重结晶。然后将胚胎放入含一定浓度非渗透性保护剂(蔗糖)的复苏液中,使渗透性保护剂逐步从胞内渗出,水分逐渐渗入细胞内,胚胎恢复正常的生理状态。