附：胚胎评分
胚胎观察及评分的操作规程：
1.提前30 min打开倒置显微镜上的恒温操作台。
2.原核的观察在受精后的16～18 h进行。根据Z分级评分系统，原核分为Z1～Z4级（图15-1）：
图15-1 原核的观察
Z1：两原核等大，核仁大小、数目相等，整齐排列在连接处。
Z2：两原核等大，核仁大小相等，数目相等，均匀分散在原核中。
Z3：两原核等大，核仁大小不等、数目不等或在原核内排列不对称。
Z4：两原核不等大或无连接或不分布于合子的中央。
说明：多原核和单原核只注明原核数。
3.D2～D3胚胎评分，Day2胚胎的观察在受精后的44±1 h进行，Day3胚胎的观察在受精后的68±1 h进行。
（1）卵裂球数目（C）
D2 d正常卵裂球数目为4～6细胞。
D3 d正常卵裂球数目为7～9细胞。
（2）卵裂球碎片含量及其分级：根据碎片占总胚胎的体积估算 （F）（表15-1）。
表15-1 卵裂球碎片含量及其分级
（3）卵裂球均一度及其分级（S）（表15-2）。
表15-2 卵裂球均一度及其分级
优良胚胎定义：第1天评分为Z1、Z2或Z3，第3天卵裂球数大于第2天卵裂球数，第3天卵裂球数为7～9个，碎片含量≤10%时（F=1），均一度（S）为1和2的胚胎均为优胚；当碎片含量为11%～20%时，只有均一度（S）为1的胚胎定义为优质胚胎，同时需满足无多核及空泡。
可利用胚胎定义：第1天评分为Z1、Z2 、Z3或Z4，第3天卵裂球数大于第2天卵裂球数，第3天卵裂球数目为4个以上，卵裂球均一度（S）为1或2且碎片含量≤20%。
4.囊胚的评分，Day5囊胚的观察在受精后的116±2 h进行。
（1）囊胚分期（图15-2）。
图15-2 囊胚分期(https://www.daowen.com)
1期：早期囊胚，囊胚腔不到整个胚胎的1/2 。
2期：囊胚腔超过了胚胎体积的1/2。
3期：完全扩张囊胚：囊胚腔完全占据整个胚胎 。
4期：扩张囊胚：囊胚腔体积稍大于早期胚胎，透明带逐渐变薄。
5期：正在孵出囊胚：滋养外胚层通过透明带向外凸出。
6期：孵出囊胚：囊胚完全从透明带孵出。
（2）3～6期再评估项目。
内细胞团：A.形态规则，直径在60μm以上，细胞大小均匀，融合。
B.形态规则，直径在60μm以上，细胞大小均匀，有一小部分没有融合。
C.明显小于正常大小，细胞数极少。
滋养层：
A.沿囊胚“赤道面”分布的卵裂球数明显超过10个，大小均匀，在囊胚底面的细胞全部形态清晰，大多数可见细胞核。
B.沿囊胚“赤道面”分布的卵裂球数10个左右，大小欠均匀，在囊胚底面的细胞全部形态清晰，大多数可见细胞核。
C.沿囊胚“赤道面”分布的卵裂球数明显少于10个，大小极不均匀，在囊胚底面的细胞难以辨认。
（3）优质囊胚定义：评分4BB及以上。
可利用囊胚定义：4BC或4CB及以上。
5.观察过程应迅速，尽量减少胚胎在体外的时间。在实验室病历上记录每个胚胎的情况。
注意事项：
（1）原核的观察在受精后的16～18 h进行，Day2胚胎的观察在受精后的44±1 h进行，Day3胚胎的观察在受精后的68±1 h进行，Day5胚胎的观察在受精后的116±2 h进行。
（2）原核和胚胎的观察时，必须使用倒置显微镜200×，认真区分空泡、SER和原核，准确判断原核的数目，辨别胞质内的其他异常情况，及胚胎卵裂球核的数目。
（3）卵子受精观察后的处理（表15-3）。
表15-3 卵子受精观察后的处理
（4）胚胎可以在Day2，授精后40～48 h进行移植；也可以在Day3，授精后66～74 h进行移植；或者在Day5～6，授精后120～144 h后的囊胚阶段进行移植。
（孙园园）