植入前胚胎活检的注意点

四、植入前胚胎活检的注意点

虽然不同生殖中心具体PGD方法各有不同,但通常认为要有效地开展PGD植入前胚胎活检认为应该注意以下几个方面。

(一)实验室基本条件

稳定良好的胚胎培养条件,规范的操作流程,有活检、固定和活检材料转移分装经验的胚胎学家,完善的标记体系,确保实验结果与来源胚胎严格对应。

(二)授精方式

所有采用PCR分析的病例都必须采用ICSI授精方式,以避免精子来源的DNA影响PCR结果。采用FISH分析的病例,ICSI和常规授精方式都可以。

(三)胚胎培养

使用微滴,尤其双井微滴培养皿进行单个胚胎培养,降低因移动而导致胚胎混合的风险。活检前,通常漂洗、机械剥离等方法,尽量去除所有附着的卵丘细胞、精子及其蛋白酶类。

(四)活检的时间(https://www.daowen.com)

1.第一极体活检可以在取卵当天,HCG注射后36~42 h进行。第一和第二极体同步活检可以在受精后9~22 h进行。PCR分析病例,第一、第二极体需要按次序进行活检。

2.卵裂期活检一般在D3上午进行,质量不良胚胎不应进行活检。

3.囊胚活检的方法很多,常见的有两种。一种是:D3透明带打孔,D5获取滋养层细胞;另一种是:透明带打孔和获取滋养层细胞都在D5进行。

(五)活检后胚胎的冻存

1.活检后卵裂期胚胎在冻存复苏存活率低于未活检胚胎,玻璃化冷冻比慢速冷冻的存活率高。

2.尽管有不同的报道,但通常认为活检后囊胚的冷存复苏存活率低于未活检囊胚,玻璃化冻存复苏存活率要高于慢速冷冻。

3.如果患者自身原因需取消移植,胚胎冻存复苏之后再行活检会更有优势。

(孙园园)