第四节　动态评估

对于胚胎质量的判断，目前多采用形态学方法，即在体外培养的过程中，根据人类胚胎受精与分裂的规律，在几个特定的时间点，观察胚胎形态，以形态学为标准对胚胎质量进行评估和分级，选择分级最高的胚胎进行移植。

目前对受精后胚胎的观察多在以下几个时间点：以取卵为第0天，胚胎发育第1天时，一般为受精后16～18 h观察原核，若超过20 h则有原核消失的风险；第2天和第3天胚胎处于分裂胚期，分别在这两天的上午对胚胎观察一次，一般为受精后43～45 h和受精后67～69 h。根据原核的数目判断受精与否与异常受精，还可对原核形态进行观察，包括原核的大小、核仁的分布与排列，分裂期胚胎则观察卵裂球数目、均一度、碎片多少与分布、胞质形态等，进行评估和分级，综合第0天至第3天胚胎评分情况预测胚胎发育潜能，选择移植胚胎。如果行囊胚移植，则将胚胎继续培养至第5天，对胚胎再进行一次观察和评估，根据囊胚的形态学标准，选择移植胚胎。

胚胎发育是动态的过程，从受精到胚胎的每一次分裂及囊胚的形成，期间经历了复杂的变化。胚胎在每一个发育阶段都有其特征，发育过程也有其速度和延续性，若仅对胚胎进行一次观察难以对胚胎质量和发育能力进行判断。因此需要对发育中的胚胎进行多次观察，综合考虑胚胎在各个时期的状况，联合各期评分，对胚胎质量做出动态的全面的评估。(https://www.daowen.com)

但是，多次观察在获得更多胚胎信息的同时为胚胎培养带来了不利因素。其一，每一次观察需要将胚胎移出培养箱，放置于倒置显微镜上进行观察。虽然在显微镜载物台上安装了恒温装置，但是气体浓度无法保证，温度和pH发生了波动和变化，胚胎暴露于标准培养环境之外，不利于胚胎发育。其二，每一次胚胎观察需要打开培养箱取出培养皿，观察完成后再次打开培养箱将其放回，两次开箱导致培养箱内温度的降低和气体的流出，恢复温度和气体到设置的最佳水平需要一定时间，若同一个培养箱内放置有多位患者的胚胎，开箱次数进一步增加，温度和气体恢复时间将更长，在此期间内胚胎始终处于欠佳的培养环境，干扰了胚胎的正常发育。为了降低观察胚胎的操作对胚胎发育的影响，要尽量减少胚胎在培养箱外观察的次数和时间，尽管由熟练人员对胚胎进行观察和评估，力求快速和高效，但是不可避免胚胎在培养箱外所经历的应激反应。因此，需要在全面观察胚胎发育动态与减少对胚胎的干扰之间找到平衡。

上述的评估方法为每天对胚胎观察一次，但是这样又导致另一方面的欠缺。每天一次的固定时间点的观察只是获得了胚胎状况的几个截面，在这几个时间点之间胚胎发育经历的变化无从得知，期间某些变化可能与胚胎发育潜能相关，亦无从评价；而且，胚胎发育有其相似规律的同时又存在患者之间的个体差异及同一患者不同胚胎之间的差异，对所有胚胎均固定在同样的时间点进行观察可能错过某些胚胎最佳的观察时机。另外，胚胎发育潜能与染色体非整倍性及基因异常有关，然而染色体异常的胚胎在早期发育中可具有与正常胚胎同样好的形态，仅从形态学上并不能反映染色体的异常。但是染色体的异常可导致DNA复制速度发生变化，体现为细胞分裂的动态参数不同。