附睾穿刺精子处理的标准操作规程

1.精液处理前一天每人配制4 mL和0.5 mL G-IVF液，分装入15 mL离心管和 5 mL圆底试管，放入37℃，6%CO2培养箱中平衡。提前30 min 准备40%和80%梯度离心液Pure Ception上下两层备用，各1 mL；处理前准备3根无菌巴氏吸管。

2.提前30 min 开启精液处理台。

3.实验室人员在手术医生、护士的见证下核对患者信息。

4.附睾穿刺前准备一个Falcon 3001皿，加入0.2 mL G-IVF液，手术医生将患者姓名写在皿盖上。附睾液抽出后放入Falcon 3001皿中，实验室人员在倒置显微镜下由低倍到高倍观察是否有精子。如发现有一条以上活动精子/2 HP，立即告诉男科医生结束手术；如未见到活动精子，重复上述操作，直到观察到有活的精子。(https://www.daowen.com)

5.反复穿刺附睾，仍未达到理想的效果，由临床医生决定是否改行TESA。

6.1×106/mL≤精子浓度＜5×106/mL，且精子PR≥15%的附睾穿刺液，可以用梯度离心法进行处理，处理后留取精子，滴取少量液体镜下观察精子情况并记录，放置室温工作台中备用。

7.精子浓度＜1×106/mL的附睾穿刺液用离心洗涤法进行处理，处理后留取精子，滴取少量液体镜下观察精子情况并记录，放置室温工作台中备用。

8.实验室人员填写附睾精液处理的表格，操作者和核对者签名。