囊胚的评分方法
对于囊胚的形态学质量，Dokras曾提出一种较为简便的分级方法，将囊胚分为3级：1级，第5或第6天形成具有清晰的滋养层细胞和内细胞团的扩展囊胚；2级，比1级囊胚发育延迟24～48 h，第6或第7天形成与1级形态相似的囊胚；3级，体外培养5～7 d形成的内细胞团与滋养层细胞内有一些退化区域并且囊腔发育差的囊胚。该方法评价指标较为简易而主观，因此应用的中心较少。
目前应用较为广泛的是Gardner提出的方法，从囊胚的扩张状态、内细胞团（ICM）和滋养外胚层的发育对囊胚进行评估。这一观察方法被称为人类囊胚分级系统或数字字母评分法，在国际IVF领域应用多年。该方法的主要的观察指标更为丰富，包括囊胚腔扩张的程度、内细胞团分级和滋养层细胞的分级。
（一）囊胚腔扩张的程度
有学者认为第5天形成的囊胚，其扩张程度与种植率关系不密切。但也有人认为并非如此。存在这种分歧的一个重要原因是，当胚胎发育处于囊胚的早期时，囊腔较小，难以细致观察内细胞团和滋养细胞的质量。而不同扩张程度的囊胚，不仅大小不一致，而且对于机械损伤及冷冻损伤的耐受性也存在明显的差别，完全孵出的囊胚非常脆弱，即使很轻柔的操作也很容易损伤滋养细胞。所以囊胚腔扩张程度的判断，对于下一步评价滋养细胞层和内细胞团的质量及决定对囊胚的操作都非常重要。
（二）内细胞团分级
内细胞团的大小与质量，与种植率存在密切关系。内细胞团微呈卵圆形，细胞的分裂速度较慢，是滋养细胞分裂速度2/3。1期、2期的早期囊胚，由于囊腔较小，难以准确区分内细胞团的界限，发育到3期以后，内细胞团的大小变化不明显。不同质量的囊胚，其细胞数量可以有极大的差异。质量良好的内细胞团直径通常在60～80μm左右，在第5天细胞数可达60个，第6天甚至超过120个细胞。有研究认为，较好质量的内细胞团面积应该超过4500μm2，内细胞团较小、细胞连接松散或能观察到退化坏死的细胞，则质量不理想，种植率降低或染色体异常的可能性更大。
（三）滋养层细胞的分级
由于滋养细胞的分裂速度比较快，因此曾有人认为滋养细胞的数量对于种植率影响不大。但是最近几年的研究发现，滋养细胞层的质量，对种植率有重要影响，甚至多篇文献认为其质量的好坏对种植率的影响大于内细胞团质量的作用。
根据这个分级方法，第5天最好的囊胚评分应该是4AA，根据国外文献报道，这种质量的囊胚，进行单囊胚移植的种植率超过50%。但是，由于内细胞团和滋养细胞层二者之间的评分具有独立性，因此，也就给移植时囊胚的选择带来了困惑，我们究竟应该选择一个4BA级的囊胚，还是应该选择一个4AC级的囊胚？虽然理论上内细胞团将来会发育成为胎儿，发育上可能比滋养细胞层有更重要的意义，但是具有A级内细胞团的囊胚是否就一定优于B级内细胞团的胚胎？将来发育为胎盘的滋养细胞层对于着床也必然起到非常重要的作用。
综合目前文献，内细胞团质量为A或者为B级，对临床妊娠无显著影响，但是C级内细胞团会显著影响妊娠结局，而滋养细胞层对妊娠率也有显著影响，随着滋养细胞层质量评级的下降，着床率明显下降。因此，在进行囊胚移植的胚胎选择时，需要重视滋养细胞层的质量。在内细胞团质量为C的囊胚，不建议用于移植或冷冻，而内细胞团质量为A或B的囊胚，选择时主要根据滋养细胞层的质量进行。(https://www.daowen.com)
（四）其他评价内容
人类囊胚分级系统与Dokras的分级标准相比，细化了观察指标，根据囊胚发育阶段、内细胞团和滋养层细胞的综合情况来对囊胚质量进行评定，分级更细，评定更全面。但囊胚形态学评定的主观性仍较强，迫切需要一个统一的量化指标对囊胚质量进行分级界定。另外，在观察囊胚时，还会出现其他一些情况，未被包含在人类囊胚分级系统的描述中。
1.皱缩的囊腔
有时观察囊胚时会发现部分囊胚的囊腔塌陷，或称为皱缩。此时难以对滋养细胞层和内细胞团进行准确的质量评估。实际上，多数囊胚从早期发育到完全孵出（3～6期）的过程中，会发生多次囊胚的自然皱缩和恢复扩张，但是皱缩状态持续的时间很短，通常不超过1 h，因此观察到皱缩状态的机会较少。对于这种囊胚，可以等待1 h，待囊腔扩张后进行重新评分。如能够重新扩张，则对种植率几乎无影响，但如果大多数被观察到的囊胚均处于皱缩状态，或者等待足够长的时间囊腔仍不能恢复扩张，则说明培养体系出现了严重问题。
2.碎片
在卵裂期胚胎内的碎片，有一部分在发育过程中吸收，但有部分在随后的胚胎致密化过程中，被致密化的细胞团排除在外，随着囊腔的形成，被挤压在滋养细胞层和透明带之间。如果囊胚腔塌陷，则更容易分辨，这些碎片附着于透明带，而滋养细胞层则与之脱离。在随后囊胚孵出的过程中，这些碎片残留在透明带内，不参与后续的胚胎发育与着床。但是胚胎从受精后发育到囊胚的阶段，来自卵母细胞提供的原生质总量没有增加。因此碎片的存在，往往伴随着滋养细胞和内细胞团细胞数量与形态评分的下降。
3.大细胞
部分胚胎在致密化过程中，还有可能将整个细胞排斥在外，或者包裹在其内部，囊腔形成后，这些大细胞存在于囊胚内或囊腔外。与碎片类似，这种情况通常对种植率没有明显影响，但是大细胞的存在，往往伴随着囊胚滋养细胞层或内细胞团评分的下降。
（孙园园）