联合形态评估系统的应用
卵母细胞成熟、受精到胚胎分裂、囊胚形成,种植前胚胎的体外发育过程复杂而精准。在这个连续的动态发育过程中,胚胎的潜能受到多个方面的影响,每个发育阶段胚胎都有其专有特征,一次观察单一指标难以辨别出适宜移植的胚胎。因此在形态学评估方面,建立了联合胚胎评分系统,评分方法标准化,以选择合适胚胎进行移植。
联合形态评估系统中通常涵盖了原核期和分裂期胚胎的评价方法。原核评价的主要内容是原核的形态、核仁前体的数量和分布,关注原核的发育速度,注重2个原核的同步化。原核大小一致且相对排列于胞质中央,核仁数目相等且在原核相邻处线形排列,胞质聚集,围绕原核成细颗粒化区域,这样的合子被认为是优质合子。由于受精卵的形态不能完全反映胚胎的后续发育状态,原核评分在联合评分系统中的价值有限,但仍较客观地反映了原核期胚胎的质量。卵裂期胚胎的评价包括了早期卵裂、受精后第2天、受精后第3天三个时间节点的胚胎形态特征,进一步观察了从受精卵发育到胚胎的动态过程。细胞分裂速度、卵裂球的大小均等性、碎片的数量及分布类型、卵裂球多核现象及其他胞质特征是优质分裂期胚胎选择用于移植的主要形态学依据。最好的卵裂期胚胎在发育速度上被认为细胞卵裂同步,受精后第2天的胚胎以4细胞为最佳,第3天的胚胎以8细胞且前一天4细胞为最佳。形态学上卵裂球大小应均一,没有细胞碎片,卵裂球内单核,无特殊异常胞质特征。透明带有薄弱区域、折光性好的胚胎被认为容易种植。冷冻复苏后的胚胎,卵裂球间的连接是一个重要的形态观察指标。移植胚胎选择时应正视胚胎发育的连续性。
累计胚胎评分方法从原核到第3天胚胎联合评分。连续1~3 d的观察评估胚胎早期发育阶段的形态变化,包括核的排列、正常卵裂、第一次细胞分裂的碎片程度、第3天的卵裂球数目,对称性和碎片程度。具体的评分标准包括:受精后16~18 h核仁在原核轴成极性排列评20分;受精后25~27 h早期卵裂,细胞均匀评30分、无碎片评30分、碎片<20%评25分、碎片>20%评0分;受精64~67 h根据细胞数目和级别评分,7细胞1级、8细胞1级、8细胞2级、9细胞1级评20分,7细胞2级、9细胞2级、10细胞1级、11细胞1级、正在融合的1级胚胎评10分。胚胎总得分最多100分。累计评分结合了原核形态、早期卵裂和第3天胚胎形态来预测胚胎种植能力,简单、有效,比单纯第3天形态评分更有意义。高评分胚胎的囊胚发育与妊娠结局更优。(https://www.daowen.com)
依靠卵裂期胚胎形态预测胚胎活力仍不够准确,许多IVF中心延长胚胎培养时长至第5或第6天,观察囊胚形成能力,挑选单个囊胚移植。一方面延长胚胎观察挑选的时间,另一方面减少移植胚胎的数量。这种选择性单胚胎移植的做法减少了35岁以下妇女在高妊娠结局的同时伴随多胎妊娠的风险。
胚胎质量关系妊娠结局。选择最具有发育潜能的优质胚胎进行移植是保证临床结局的重要前提。联合评估系统整合了多重参数,在众多的胚胎发育和形态指标中,最具有种植潜能的优质胚胎的形态学特征如下:原核及核仁对称,核仁呈偶数;受精后25~27 h出现早期卵裂;43~45 h卵裂球数目大于或等于4个;受精后66~68 h卵裂球数目大于或等于8个,碎片少于20%,卵裂球没有多核;114~118 h囊胚形成,囊腔扩张,内细胞团细胞数多且致密,滋养层细胞数目众多。