原核的数目评估

（一）两原核

正常的受精卵具有明显的双极体（2PB）和两原核（2PN）。两原核必须是紧靠的，大小大致相当，并且位于胞质的中央，具有清楚可见的核膜。如果两原核中出现相同数目和大小的核仁，且沿着两原核的连接处排列，胚胎的发育潜能会增加。

（二）无原核

无原核（OPN）的合子，一种可能是没有受精，另一种可能是已受精但未观察到原核。通过观察双极体或早期卵裂可以估计是否受精。

（三）单原核(https://www.daowen.com)

在IVF/ICSI过程中单原核（1PN）合子的发生率一般是2%～6%。1PN合子可能是由于母细胞的孤雌激活而引起。经过染色体分析发现1PN合子约有一半以上是单倍体，这样的合子卵周隙中只有一个极体。此外，1PN合子也有可能是由于原核不同步出现或雌雄原核融合引起，这些合子一般具有二倍体染色体，且卵周隙中有两个极体。来源于1PN合子的胚胎发育潜能低下，在体外的发育速度、囊胚形成率和扩张囊胚比例显著低于2PN合子，而非整倍体的发生率要显著地高于2PN来源的胚胎。虽然1PN发育的胚胎移植后已有成功妊娠并分娩的报道，但是1PN合子的异常率偏高，尤其ICSI周期不建议用于胚胎移植。这些胚胎可延长体外培养至D5/D6后，对形成的囊胚行植入前遗传学诊断（PGD）或植入前遗传学筛查（PGS），正常二倍体的囊胚可以行冷冻保存或移植。

（四）三原核

三原核（3PN）合子的形成原因多样。IVF中3PN合子多由双精受精引起，由于卵母细胞未启动保护机制来阻止多精穿透，发生率为5%～8.1%。这些合子的第二极体都能正常排出和卵裂。也有可能为一条双倍体精子穿透卵子引起的多PN合子。ICSI中卵子第二极体没有排出会形成3PN合子，发生率有2.5%～6.2%；另一个原因原核形成异常，受精卵是二倍体，但形成多个原核，如遗传学分析为二倍体的巨形卵会形成3PN合子。

IVF中的3PN合子多由双精受精形成，因此通过显微操作选择性去除一个多余的雄原核，即距离第二极体最远的那个原核，可以恢复成正常的二倍体胚胎。通常第二极体比第一极体大一些，且第二极体紧靠胞质，雌原核离第二极体最近。应用显微操作选择性去核方法对72枚IVF的3PN合子进行雄原核去除实验，结果有56枚合子存活，其中51枚合子具有明显的2PN，有21枚发育至囊胚阶段。用荧光原位杂交FISH）技术分析了其中的8枚囊胚，结果发现有4枚是正常的二倍体囊胚（3枚46，XY和1枚46，XX）。此外应用短串联重复序列（STRs）方法分析了6枚囊胚的遗传基因源性，结果发现有4枚囊胚是异源二倍体，说明这些囊胚是去除了多余的雄原核后恢复的二倍体胚胎，从形态上观察与正常2PN合子来源的囊胚没有差异。有报道应用该技术后获得了成功分娩，且新生儿脐带血经细胞遗传学分析为正常核型。通过选择性显微去核技术可以增加可移植胚胎的数目，使那些几乎没有正常受精而只有3PN合子的患者受益，但是这项技术临床应用的有效性和安全性还需要进一步研究。ICSI后形成的3PN合子使用显微去核技术有争议。因为ICSI中第二极体没有排出而形成3PN合子，形态学特征难以判断多余的雌原核。随机从去除一个原核，会导致非整倍体胚胎的产生。