异常受精卵的临床处理对策

三、异常受精卵的临床处理对策

(一)异常受精卵的临床移植价值

安全角度出发,应优先考虑移植发育良好的正常受精胚胎。但是对于获卵数少且无正常受精胚胎移植的患者,选择异常受精的胚胎移植尚有一定临床意义。

1.无PN(2PB)的移植价值

在授精后18~26 h再次观察原核和极体的数目有助于发现原核发育不同步的延迟受精卵母细胞。研究证实,2PB的存在可排除二倍体双雌胚胎。若将无PN(2PB)胚胎行囊胚培养有助于鉴别孤雌激活或正常二倍体胚胎,因为孤雌激活胚胎因缺乏父源性基因组常不能发育到8细胞以上。因此,对于缺乏正常受精可移植胚胎的IVF患者,若有无PN(2PB)发育形态和速度正常的胚胎,可以在患者充分知情同意的情况下移植。更恰当的做法是行PGD证实为正常二倍体胚胎后进行移植。

2.1PN的临床移植价值

研究证实不同受精方式中的1PN形成机制及临床价值不同。国外学者通过对比IVF和ICSI周期中1PN受精卵的胚胎进行FISH。结果显示:胚胎性染色体二倍体率分别为54%和35%;单倍体率为23%和91%;嵌合体率为21%和74%。虽然1PN受精卵的囊胚形成率极低,且许多学者认为移植1PN受精卵发育来的胚胎没有临床意义,一般不建议用于胚胎移植。但是鉴于IVF周期中1PN受精卵的二倍体率较高,且原核可以发育到质量较好的正常胚胎,认为IVF周期中的1PN胚胎有一定临床移植价值。在胚胎数量少、患者知情同意的前提下,可行PGD进行胚胎非整倍体筛选后进行移植,已有较多成功妊娠的报道。但是ICSI周期中1PN受精卵大部分继续培养可出现分裂受阻,认为ICSI周期中1PN不具有临床移植价值。

3.多PN的临床意义

一般不能正常发育,通常弃去,不用于移植。与IVF相比,ICSI后3PN的三倍体率显著增高,多余的PN不是来自精子,而很可能来自未排出的第二极体。对于IVF的多原核受精卵,由于三倍体异常率显著增高,临床不建议移植。

多精受精现象对临床也尚有一定指导意义。多精受精的发生建立在受精成功的前提下。多精受精率显著增高说明该患者IVF周期中精子的受精能力和卵母细胞对精子的接受能力良好。此外,在受精精子密度相近的情况下,多精受精高发的周期,其受精率和妊娠率均较正常受精组低,这可能预示着本周期卵母细胞质量较差。

(二)如何减少多精受精

胚胎实验室质量控制的内容之一是确保受精,减少异常受精。只有保证正常受精卵母细胞的比例,才能最大限度地实现对卵母细胞的利用。多精受精的出现,毫无疑问减少了可利用胚胎的比例。如何将多精受精率控制在比较理想的水平,这些都是研究者不断探索的问题,目前认为有效的方法有。

1.提高卵母细胞成熟度

卵母细胞未成熟或过成熟可导致多精受精发生增加。因此,应在促排卵周期减少Gn剂量,增加卵泡的同步发育;在取卵过程中应尽量收集卵泡大小均匀一致的卵母细胞,尽量取出成熟的卵母细胞,减低多精受精率的发生。(https://www.daowen.com)

2.避免受精浓度过高

精子聚集或精子浓度过高,多精受精率升高。可能是由于精子数量增多或浓度增加可导致卵母细胞皮质颗粒释放延迟,多精受精发生增加。

3.减少对卵母细胞的机械刺激

尽量减少对卵母细胞透明带的损伤而导致的多精受精。卵母细胞收集和处理过程中,机械损伤会增加透明带出现裂口的机会,也可导致多精受精的发生。特别是在短时受精时,有研究者认为在保证患者受精的前提下,可以部分去除颗粒细胞,将剩余的卵母细胞保留颗粒细胞第二天再去除,可以大大降低多精受精的发生。

4.保持受精培养液pH及温度稳定

受精培养液pH是调节精子获能和顶体反应的一个因素,培养基pH升高有利于提高受精率,但是皮质颗粒中的酶类活性就会降低而导致多精受精发生。高温(38.5~39℃)体外受精,大量精子获能,但是其与多精受精的相关性尚待深入研究。

5.改变受精方式

如果IVF周期多精受精的发生率较高,在接下来的周期实行ICSI受精可能是减少多精受精的有效手段。有研究者报道,对于IVF周期多精受精发生率较高的患者,采用ICSI受精后70%周期完全没有了3PN,95%周期的3PN显著减少;且ICSI周期的3PN率为5.0%,大大低于之前IVF周期的33.9%。

6.避免在受精过程未完成时,特别是在原核形成过程中对卵母细胞的干扰。

(三)显微操作去除多余原核技术在多精受精中的应用

研究现状:文献报道约7%的胚胎是由多原核合子发育而来的。而且发生异常受精后,几乎没有措施拯救异常受精卵。有研究者认为对于多精受精引起的3PN受精卵,通过显微操作去除1个雄原核,可使3PN受精卵成为正常的二倍体,并可发育成正常胚胎。目前已有通过此技术获得成功妊娠的报道。但是,事实上雄原核是难以明确判断的,如果错误去除母源性原核可能导致双雄胚胎的发生,移植后可出现流产及葡萄胎等风险。因此,此项技术只是停留在实验室阶段。

主要面临的困难有:雄原核与雌原核鉴定困难、去除原核的时间选择困难和技术问题。目前这方面的研究还在进一步深入。

(林晓潭)