一、玻璃化冷冻中使用的冷冻保护剂
在玻璃化冷冻过程中,也需要同时采用渗透性保护剂和非渗透性保护剂。常用的渗透性冷冻保护剂有二甲基亚砜、乙二醇、丙二醇、甘油、乙酰胺等。其中二甲亚砜的渗透速度最快,甘油最慢,而乙二醇的毒性最低,丙二醇次之。
非渗透性抗冻保护剂最常用的为蔗糖,不能自由渗透入细胞膜,可提高细胞外渗透压,促进细胞脱水。在复苏过程中,和程序冷冻复苏的原理相同,能防止由于水分过快进入细胞,渗透性冷冻保护剂脱出细胞较慢,而导致的细胞过度膨胀(渗透性休克)。(https://www.daowen.com)
其他冷冻保护剂,包括白蛋白、聚蔗糖、聚乙二醇、葡聚糖等,起到的保护作用机制包括稳定细胞膜结构,提高黏滞系数,抑制冰晶形成等。目前常在人类胚胎冷冻保存实践中应用的包括白蛋白和聚蔗糖。