四、推注技术
胚胎移植过程一直以来被认为是辅助生殖技术中比较重要的一项技术。在过去的几年里,胚胎移植方法越来越受到关注。一些与移植相关的正相关因素包括:移植导管没有血和黏液、没有细菌污染、不接触子宫底部、B超下引导等。大量的研究表明环境因素对卵母细胞和胚胎产生一些负面效应,如暴露于光照下、温度改变、气体浓度改变等。因此许多避免这些因素改变的设备及装置被设计出来并应用于配子处理及胚胎培养过程,从而减少对卵母细胞及胚胎的损伤。
从胚胎被装进移植导管到胚胎植入子宫的条件改变是比较难以控制的过程。推测较长时间的间隔可能会导致妊娠率及种植率下降。胚胎装载与推注入子宫的时间间隔与妊娠结局相关。持续时间越长,妊娠率与种植率越低。持续时间为120秒之前,随时间的延长,妊娠率逐渐降低,当超过120秒后,妊娠率及种植率急剧下降。因此建议胚胎移植过程时间要尽可能短,最佳时间应为30秒以内,尽量不要超过120秒。
胚胎移植推注速率在移植过程中的重要性近年来颇受关注。应用计算机程序模拟移植过程对移植压力等做了系统研究,研究发现,移植管内压力在0.1秒内很轻易就达到155 mmHg,这些强大的外压在移植推注过程中都将作用于移植管内的胚胎。另一项研究发现由于移植推注压力将引起小鼠囊胚的形态学改变并可能导致细胞凋亡的发生。同样,不同推注速率对早期发育胚胎的影响也有实验进行了验证。推注速率过快将导致胚胎受到的外压瞬间增大,从而可能导致胚胎发育停滞及胚胎的细胞损伤。因此,在移植推注过程中建议推注速率应尽可能慢,这样使移植管内的胚胎受到的外压更小,从而保证胚胎质量,获得更为满意的临床结局。
胚胎在超声引导下被无损伤地送达子宫腔内的过程非常关键。移植困难、宫颈的处理、多次接触宫底等都会导致妊娠率的降低。其主要原因可能为这些操作刺激子宫收缩,不能让胚胎停留在移植位置,甚至导致胚胎排出或进入输卵管而增加宫外孕发生的风险。自体外受精技术应用以来,通常认为在移植导管撤离前在宫腔中停留30秒可以使子宫收缩重新稳定,有利于胚胎着床。