有机溶剂提取法

有机溶剂提取法即经典的饱和酚-氯仿提取法；基本提取过程分为四个步骤：首先在碱性和螯合剂EDTA条件下溶解细胞膜和核膜；其次利用阴离子去污剂SDS和蛋白酶K消化核蛋白，分离DNA；再次用苯酚和氯仿有机溶剂萃取DNA，除去蛋白酶、去污剂和残留蛋白；最后用乙醇沉淀DNA去除残留的氯仿，得到纯净的检材DNA。提取过程中，EDTA既可整合金属离子Ca2、Mg2等，还可抑制核酸酶活性，起到保护DNA的作用。有机溶剂可使核蛋白变性溶解。离心后，有机溶剂位于离心管下层，溶解有DNA的水相在上层。有机溶剂提取法可以从检材中提取到20kb以上的大分子DNA，DNA纯度较高。