四、硅珠法

硅珠法提取DNA的原理是，裂解细胞膜和细胞核膜，使DNA释放出来，在高浓度的硫氰酸胍存在下，DNA被二氧化硅特异性地吸附；被吸附的DNA在没有硫氰酸胍存在下，DNA又从二氧化硅中释放出来。硫氰酸胍是高性能的蛋白质变性剂，可以使细胞裂解，并使核酸水解酶失活，蛋白质与DNA分离，在硅珠吸附前高速离心可以将变性的蛋白质等不溶物除去，吸附后的漂洗可将溶液中的PCR抑制物除去。因此提取的DNA比较纯，回收率高，可以从0.1μl的血液中提取到足以进行PCR反应的DNA。

【具体方法】

适量检材加入含有100μl TES 和20μl十二烷基矶氨酸钠的0.5ml离心管中，煮沸10min，再加入300μl吸附液，旋涡混合5s，再加入20μl硅珠悬浮液，旋涡混合5s，室温放置10min～15min，旋涡混合5s，7500r/min离心15s，去上清液。沉淀物加入200ul70%冷乙醇，充分悬浮沉淀物，7500r/min离心15s，去上清液，重复用70%冷乙醇漂洗一次。去乙醇，加入适量TES，旋涡混合，56℃保温10min，12000r/min离心2min，取1-2μl上清液直接进行PCR反应。