肿瘤的病理学检查方法
目前，病理诊断仍然是临床多种疾病诊断中的金标准，被称为“最后的诊断”。肿瘤的确诊就主要靠病理学检查。它对于鉴别真性肿瘤与瘤样病变，确定肿瘤的良恶性、组织学类型以及肿瘤的侵袭、转移情况等，起着决定性作用，并为临床医生选定治疗方案和判断预后提供重要依据。
病理检查方法包含了光镜检查、电镜检查和运用分子病理学的技术手段如免疫组织化学、分子杂交和流式细胞仪等技术手段。以下介绍最常规的病理学检查方法。
（一）细胞学检查
肿瘤细胞学检查分为脱落细胞学和针吸细胞学两大部分。前者是根据肿瘤细胞间黏附力降低易脱落的特点，采集含有脱落细胞的体液（如胸腹水、脑脊液、尿液、关节液等）或分泌物（来自呼吸道、消化道、泌尿生殖道等处）制成涂片；后者是通过细针抽吸的方法获取某些部位（如乳腺、甲状腺、淋巴结、肝、肾等和腹、盆腔及软组织等处的肿物）的肿瘤细胞，制成涂片。然后对涂片进行染色，以肿瘤细胞的异型性作为形态学依据，在光镜下观察、识别异型细胞或恶性肿瘤细胞。如采集阴道分泌物涂片或宫颈刮片诊断子宫颈癌、痰涂片诊断肺癌和胸、腹水涂片检查有无原发或转移癌等。
细胞学检查的优点是简便、安全、快速、经济，可重复检查，已成为肿瘤普查和早期诊断的重要手段之一。其缺点是不能观察组织结构，可出现假阴性，不如病理组织学准确，故不能与病理诊断等同。
（二）活体组织检查
从患者病变部位采取组织，制成病理组织切片，在光镜下观察细胞形态和组织结构的变化，并结合有关临床资料做出病理诊断，称为活体组织检查，简称活检（biopsy）。它是各种疾病和肿瘤诊断中最常用的、有高度准确性的方法。(https://www.daowen.com)
活检组织的病理切片一般采用常规石蜡切片和HE染色方法制作，到发出诊断报告一般需要2~3d。有时为了尽快了解病变性质，确定手术范围和淋巴结有无转移等，在手术中切取小块病变组织，快速做出病理诊断。一般采用冰冻切片法，可在20~30min左右做出病理诊断。目前，也有不少缺乏冰冻切片设备的单位，采用快速石蜡切片代替冰冻切片，效果较好，但所需时间稍长。
（三）免疫组织化学
免疫组织化学是利用抗原抗体结合反应的原理，在组织切片上检测特定物质的技术。其基本方法是将特异性抗体与组织切片中相应抗原反应，然后根据标记物的要求通过酶反应、荧光激发、胶体金等某种适当的方式显示抗原，以证明其存在。免疫组织化学在肿瘤病理研究和诊断中具有广泛的用途，如原位检测肿瘤中各种基因的表达、确定肿瘤的分化方向、了解肿瘤的增殖状态等。
（四）电镜
电镜检查是肿瘤病理诊断的一种重要方法，常用于明确光学显微镜不能确诊的未分化肿瘤的分化方向。例如鉴别分化差的癌与肉瘤、区分各种恶性小圆细胞肿瘤。在电镜下癌的肿瘤细胞之间常见较多的桥粒连接或桥粒样连接，以此与肉瘤相区别；不同恶性小圆细胞肿瘤的超微结构各有特点，如神经母细胞瘤常见大量树状细胞突，在肿瘤细胞体及胞突中均可查见微管和神经分泌颗粒，胚胎性横纹肌肉瘤可见肌原纤维和Z带构成的发育不良的肌节，小细胞癌可见细胞间连接和胞浆内神经分泌颗粒。
（五）分子病理检测
随着对肿瘤发病机制研究的不断深入，现已发现越来越多的肿瘤具有明确而特异的分子遗传学改变，如特定染色体之间的易位，特异的点突变、基因缺失或过度扩增，这些改变成为特定肿瘤的“身份证”或称分子标识，并且与肿瘤的生物学行为和临床特定的药物治疗和选择相联系。肿瘤的分子病理检测技术将分子生物学的方法与病理形态学的方法相结合，用于检测肿瘤的染色体、DNA、RNA、蛋白质及表观遗传改变等方面的异常。所涉及的检查方法主要有原位杂交、荧光原位杂交（FISH）、显色原位杂交（CISH）、PCR、RT-PCR、核酸序列测定、芯片分析等等。基因突变分析和克隆性分析是临床应用较为广泛的分子病理检查方法，如EGFR、KRAS基因的突变分析用于指导临床分子靶向药物的用药。原位杂交和FISH也成为肿瘤的常规分子病理检测技术。FISH是运用核酸杂交原理，通过检测荧光定性和定位目的核酸片段，具有敏感、快速、能同时显示多种颜色等优点，不但能显示中期核分裂象的染色体，还能检测间期细胞核的DNA，既能在新鲜组织细胞中检测，也能用石蜡切片作为待检测的材料。FISH主要应用于各类细胞间期核的非整倍体检测、肿瘤染色体畸变或位点突变的分析、染色体易位的确定等。FISH还可检测特异基因的扩增，如检测乳腺癌中HER2的扩增，可指导临床选择Herceptin的治疗。克隆性分析是通过分子生物学的方法确定一群体细胞是单克隆性的还是多克隆性的，常用的方法有T、B细胞受体基因重排的克隆性分析、基于X染色体连锁的体细胞克隆性分析、细胞表型分析、体细胞突变位点分析、染色体中病毒DNA整合位点分析。随着对肿瘤分子发病机制认识的不断深入，越来越多的肿瘤分子靶向药物的诞生，肿瘤的分子病理检测的应用越来越广泛。