1.2 实验方法
2025年08月10日
1.2 实验方法
1.2.1 麻醉、给药装置3.0%戊巴比妥钠(1.0mL/kg)耳缘静脉缓慢注射。麻醉成功后,将兔仰卧位固定于手术台上。分离左侧颈内静脉,行静脉插管,外接一次性精密输液器,用于微量泵持续给药。
1.2.2 动物模型的制备与给药取上腹部正中切口进腹,显露第一肝门;游离脾静脉,远段结扎,近段切开置管固定以备给药。采用Pringle法[5],用无损伤小动脉夹阻断入肝血流30min,造成肝脏缺血;解除钳夹,恢复肝脏血流即为再灌注。异丙酚[8mg/(kg·h)]用微量泵分别经颈静脉及门静脉注射,于入肝血流阻断前20min完成注射。
1.2.3 标本的采集及检测A组于术后90min,B,C,D 3组均于恢复灌注后60min经下腔静脉抽血4mL备检测。同时取左外叶肝组织少许按要求制成匀浆后离心液备检测。Olympus 7600全自动生化分析仪测定血清谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT),用硝酸还原酶法测定一氧化氮(NO)(试剂盒购自南京建成生物工程研究所);放射免疫法测定内皮素-1(ET-1)(试剂盒购自解放军总医院科技开发中心放免所);生物发光法测定组织ATP含量(试剂盒购自中国科学院上海植物生理研究所)。