适合中药相互作用研究的基于药物代谢酶与受体通路的快速筛选方法

综合采用分子生物学等相关方法，创建了基于PXR-CYP3A4通路的药物相互作用快速筛选技术。主要包括双远端增强子和近端启动子线性串联的分泌型荧光素酶报告基因的构建、体外筛选工程细胞株的建立、报告基因技术可靠性验证及在中药化学成分相互作用快速筛选中的运用。在瞬时转染对比实验中，双远端增强子的分泌型荧光素酶报告基因表现出比单远端增强子的p GL4.17报告基因更优越的RIF诱导响应性能；该报告基因不仅绝对荧光强度值要显著高于单远端增强子分泌型荧光素酶报告基因，而且RIF诱导效能明显提高。利用此筛选模型，对130余种中药化学成分单体进行了筛选实验，获得了具有潜在CYP3A4诱导和抑制能力的目标化合物。