发现中药作用规律，阐明作用机制，形成防治POP的整体观思想

发现了温肾阳和滋肾阴中药都具有“双重调节骨代谢平衡”的作用规律，阐明了补肾中药及有效组分调控骨代谢的作用机制，形成了“调和肾阴、肾阳”防治POP的整体观思想。

建立了“中药防治POP体内、外筛选系统”和“补肾中药有效组分库”，筛选出疗效确切的补肾中药有效组分。在去卵巢骨质疏松大鼠模型的基础上，证明补肾益精方及温肾阳、滋肾阴颗粒通过增加骨密度、提高生物力学载荷，改善骨结构，防治POP。利用12×SBE-OC-Luc报道基因，转染至成骨细胞，获得单克隆细胞株，建立了“中药防治POP体外筛选系统”及“补肾中药有效组分库”。选出补肾中药及相关有效组分骨碎补总黄酮、淫羊藿苷、补骨脂素、蛇床子素能够增加成骨细胞中BMP的表达，优于益气类、化瘀类中药。利用Wnt/β-Catenin、BMP2/4/7、OPG基因敲除小鼠和去卵巢大鼠模型，建立了“中药防治POP体内筛选系统”。证明了温肾阳、滋肾阴颗粒及其有效组分骨碎补总黄酮、淫羊藿苷、补骨脂素、蛇床子素、齐墩果酸能够促进骨形成，抑制骨吸收，从而抑制骨量丢失。

进一步证明了温肾阳颗粒主要是通过上调Wnt/β-Catenin-BMP信号通路，促进BMSCs成骨分化，促进骨形成；同时还可以间接调节OPG/RANKL信号，抑制骨吸收。其中淫羊藿苷、骨碎补总黄酮上调β-catenin-BMP信号通路[Front Biosci，2012（1）：1224-1236]；补骨脂素上调BMP信号通路[Menopause，2012（19）：1040-1048]；蛇床子素上调成骨细胞中β-Catenin信号转导通路，抑制RANKL信号[JBMR，2010（25）：1234-1245]。滋肾阴颗粒一方面通过下调Notch信号通路，促进骨形成，另一方面通过直接调节OPG/RANKL信号，抑制骨吸收。女贞子、旱莲草有效组分齐墩果酸通过调节Notch信号通路，促进BMSCs成骨分化；抑制骨吸收的分子机制与调节OPG/RANKL信号相关[Menopause，2012（19）：225-233]。